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cytoskeleton代深圳試劑
產(chǎn)品時間:2024-05-17
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乙酰賴氨酸工具

概述

翻譯后乙?;l(fā)生在賴氨酸殘基的ε-氨基上,作為一種可逆且高度動態(tài)的PTM,已知其是多種細胞事件的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,包括染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄、代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和細胞骨架調(diào)節(jié)。

主要功能

首乙酰賴氨酸研究者的優(yōu)化試劑盒

分析細胞或組織樣品中內(nèi)源性或轉(zhuǎn)染蛋白的乙?;?/p>

最完整的乙?;鞍踪|(zhì)圖譜

化學(xué)計量分析帶來更深入的機理見解

查看備受關(guān)注的Signal™Seeker工具箱的新增內(nèi)容(如下)

新格式-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒(目錄號BK163-S.15測定)

新格式-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒(目錄號BK16330個測定)

-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒-AAC03(目錄號BK164,30個測定)

新格式-乙酰賴氨酸親和珠(AAC04

乙酰賴氨酸抗體小鼠單克隆抗體

乙酰賴氨酸小鼠單克隆抗體

抗乙酰賴氨酸抗體是一種泛乙酰賴氨酸酯小鼠單克隆抗體,是Signal Seeker™產(chǎn)品線的一部分??挂阴Y嚢彼峥贵w識別通過賴氨酸殘基的ε-胺基團上的乙?;M行翻譯后修飾的蛋白質(zhì),所述賴氨酸殘余基出現(xiàn)在所有蛋白質(zhì)的30-50%上,特別是組蛋白、p53、微管蛋白和肌球蛋白。使用乙?;鞍椎膶S谢旌衔飦懋a(chǎn)生高度強健的抗體,該抗體已被證明在IPWB、ChIPIF應(yīng)用中識別廣泛的乙?;鞍住_@種抗乙酰賴氨酸抗體與其他市售抗體相比具有許多優(yōu)點,如下所示。

已驗證的應(yīng)用程序

使用乙酰賴氨酸抗體的蛋白質(zhì)印跡

細胞骨架的抗乙酰賴氨酸抗體類別#AAC01識別0.005ng化學(xué)乙?;?span>BSA,并且在靈敏度上與其他市售抗體相當(dāng)。與其他抗乙酰賴氨酸抗體不同,該抗體與非乙?;?span>BSA沒有顯示出交叉反應(yīng)性。要查看完整的蛋白質(zhì)印跡比較,請參閱優(yōu)化方案或產(chǎn)品數(shù)據(jù)表。

乙酰賴氨酸蛋白質(zhì)印跡

使用乙酰賴氨酸抗體的免疫沉淀

AAC01IP組蛋白的能力與其他市售抗體進行比較。Cytoskeley的抗乙酰賴氨酸抗體為IP應(yīng)用提供了明顯的優(yōu)勢。每個試管足以進行大約20IP測定。要查看完整的免疫沉淀比較,請參閱優(yōu)化方案或產(chǎn)品數(shù)據(jù)表。

乙酰賴氨酸免疫沉淀

使用乙酰賴氨酸抗體的免疫熒光

將未經(jīng)處理(頂部)或用TSA5mM,12小時)處理(底部)的人表皮樣癌A431細胞按本方法所述染色。乙?;募毎|(zhì)和細胞核蛋白在綠色熒光中可見。注意,與未處理的對照相比,TSA處理的樣品中乙?;⒐芫W(wǎng)絡(luò)清晰可見。熒光核強度表明核中乙?;鞍椎呢S度很高。要查看完整的免疫熒光方案,請參閱優(yōu)化方案或產(chǎn)品數(shù)據(jù)表。

乙酰賴氨酸IF

使用乙酰賴氨酸抗體的ChIP

染色質(zhì)由未處理或TSA處理(5mM,4小時)的A431細胞制備。簡言之,用1%甲醛固定細胞10分鐘,并通過使用抗乙?;贵w(1:100稀釋)免疫沉淀酶切染色單體。通過引物對擴增管家基因GAPDH的啟動子區(qū),并通過2%瓊脂糖凝膠電泳分析PCR產(chǎn)物。要查看推薦的ChIP協(xié)議,請參閱優(yōu)化協(xié)議或產(chǎn)品數(shù)據(jù)表。

蛋白質(zhì)乙?;尘?/p>

蛋白質(zhì)的乙?;梢宰鳛楣卜g或翻譯后修飾(PTM)發(fā)生(1)。共翻譯乙?;l(fā)生在大約85%的哺乳動物蛋白質(zhì)的N-末端,它是不可逆的,被認為在蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性、定位和合成中很重要(1)。翻譯后乙酰化發(fā)生在賴氨酸殘基的ε氨基上,作為一種可逆且高度動態(tài)的PTM,已知其是多種細胞事件的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,包括染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄、代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和細胞骨架調(diào)節(jié)(2-3)。迄今為止,已有4000多種蛋白質(zhì)被鑒定為PTM乙?;陌袠?biāo),這與細胞前體中的磷酸化相當(dāng)(3)??贵wAAC01檢測乙酰賴氨酸PTMs

乙酰賴氨酸親和珠-AAC03

乙酰賴氨酸親和珠

Cytoskeley提供兩種類型的乙酰賴氨酸親和珠,Cat#AAC02珠和Cat#AAC03珠。這兩種試劑都由與G蛋白珠共價連接的小鼠抗乙酰賴氨酸抗體組成,并且都富集了廣泛的乙?;鞍?。AAC02珠粒和AAC03珠??梢越M合以提供更廣泛的乙?;鞍踪|(zhì)富集譜(Cat#AAC04珠粒是AAC02珠與AAC03珠的1:1組合)。

AAC02珠相比,AAC03珠具有重疊但獨的特異性,在檢查特定靶蛋白時可能優(yōu)于AAC02珠,請參閱詳細方法和驗證應(yīng)用程序以獲取示例。由于乙?;ǔV徽伎偘械鞍椎暮苄“俜直龋虼耸褂脙?yōu)化的試劑對成功至關(guān)重要。當(dāng)檢查新的感興趣蛋白質(zhì)(POI)的乙?;癄顟B(tài)時,建議分別嘗試AAC03珠和AAC02珠,以確定哪種試劑適合y

已驗證的應(yīng)用程序

應(yīng)用1:檢測目標(biāo)POI中的乙?;兓?/p>

AAC03珠已被證明是乙?;?span>EGFR和RhoGDI靶標(biāo)POI免疫沉淀的優(yōu)良試劑(圖1)。在HDAC抑制劑存在的情況下,AAC03-IP顯示EGFRRhoGDI的乙?;謩e增強11.3倍和2.5倍。而AAC02 Bead分別表現(xiàn)出較弱的8倍和1.1倍的增長。

1圖例:AAC03珠粒和AAC02珠粒(50µl珠漿)和1:1混合物(各25µlAAC04珠粒用于脫乙酰酶抑制劑[TSA1µM)和煙胺(1mM]處理(+)或未處理(-)的Cos-7細胞的乙酰化蛋白IP 6小時。使用抗EGFR和抗RhoGDI抗體進行蛋白質(zhì)印跡分析,并使用LiCor-Empiria軟件對信號進行定量。還進行IP測定,并對小鼠IgG對照珠的信號進行定量(印跡未顯示)。每個IP使用1 mg裂解物。

應(yīng)用2:總乙酰賴氨酸圖譜的免疫沉淀

AAC03珠顯示出強大的總乙?;?span>IP圖譜,與AAC02珠具有重疊但特異性圖譜。AAC03珠可以單獨使用,也可以與AAC02珠組合使用來研究乙?;M。

2圖例:使用AAC02珠、AAC03珠和AAC04珠(50µl珠漿)對用脫乙酰酶抑制劑[TSA1µM)和煙胺(1mM]處理(+)或未處理(-)的Cos-7細胞的乙?;鞍走M行IP處理6小時。用AAC03-HRP抗體(1:3000)洗脫并通過蛋白質(zhì)印跡分析富集的乙酰化蛋白的總圖譜。使用小鼠IgG珠作為非特異性結(jié)合的對照(Cat#CIG02)。每次IP測定使用1 mg Cos-7裂解物

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