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新生兒心肌細(xì)胞分離

，產(chǎn)率最高

貨號：nc-6031

科學(xué)家的正確策略

大多數(shù)有關(guān)新生大鼠或小鼠心肌細(xì)胞分離的方法不僅耗時費(fèi)力，而且還導(dǎo)致細(xì)胞活力低下，這是研究人員最關(guān)心的問題。

需要更多細(xì)胞來研究細(xì)胞生長，分化和死亡的細(xì)胞和分子機(jī)制的科學(xué)家將發(fā)現(xiàn)，其實(shí)驗(yàn)無法獲得低產(chǎn)量的細(xì)胞。

高性能系統(tǒng)

使用最新更新的心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)，您將*消除所有這些問題，并在一小時內(nèi)獲得最健康，產(chǎn)量最高的新生兒心肌細(xì)胞。

新生大鼠或小鼠心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)無風(fēng)險(xiǎn)，保證令人滿意。

產(chǎn)品

  貓 ＃    尺寸      價格

  Neomyt套件        nc-6031        6個Rxns     $ 415

  SureCoat（用于涂布培養(yǎng)板）    sc-9035        500毫升    

  NS培養(yǎng)基（含血清）         m-8031        500毫升    

  NW培養(yǎng)基（無血清）

  m-8032        500毫升      

    * 1個rxn可以處理5至35個新生大鼠心臟，20至80個小鼠心臟

  * Neomyt試劑盒中不包含NS培養(yǎng)基和NW培養(yǎng)基

基于miRNA的基因敲低

基于Cellutron miRNA的基因敲除（KD）具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1.高度序列特異性，與靶基因具有100％的同源性

2.比其他基因敲除方法（例如siRNA）更有效

3.允許將兩個或多個miRNA結(jié)構(gòu)克隆到同一表達(dá)盒中，以進(jìn)行單個或多個靶標(biāo)敲除。

4.具有強(qiáng)大的Pol II啟動子，可在多種細(xì)胞類型中高效表達(dá)miRNA。5

.產(chǎn)生穩(wěn)定的基因敲除細(xì)胞系

6. GFP或RFP報(bào)告基因的表達(dá)，用于監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率

7.細(xì)胞毒性很小或沒有

對照敲低載體：不   包含miRNA

miRNA敲低載體：  包含一個miRNA靶標(biāo)或兩個miRNA靶標(biāo)

誘導(dǎo)表達(dá)載體系統(tǒng)

Cellutron用Cre-Loxp技術(shù)開發(fā)了一種新型的誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，并提供了調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)基因表達(dá)的能力。該系統(tǒng)包含兩個具有強(qiáng)大CAG啟動子的表達(dá)載體，用于高效基因表達(dá)。pEGFP / RFP-miRNA-BL和pEGFP / RFP-T2A-GOI-BL是EGFP和3X終止序列的表達(dá)載體，兩側(cè)是兩個loxP位點(diǎn)，其后是一個順反子序列，用于表達(dá)RFP和miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。另外，在miRNA和編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因的表達(dá)盒的下游克隆了殺稻瘟菌素（BL）表達(dá)盒（用于在哺乳動物細(xì)胞中進(jìn)行藥物選擇）。與可誘導(dǎo)表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染需要pCreER-IRES-Puro。

共轉(zhuǎn)染后，系統(tǒng)最初僅表達(dá)EGFP，這是一種報(bào)告蛋白，可方便地監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率?？梢栽隗w外和體內(nèi)添加4-OHT，以激活Cre重組酶的條件活性形式，從而導(dǎo)致miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因的高水平和受調(diào)控的表達(dá)。

誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)使您能夠：

1.在分裂和非分裂細(xì)胞（包括成體和胚胎干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞）中高效轉(zhuǎn)染。

2.在體內(nèi)和體外條件表達(dá)miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。

3.生成穩(wěn)定的細(xì)胞系，以長期表達(dá)miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。

該系統(tǒng)最初表達(dá)EGFP，經(jīng)過4-OHT處理后，有條件活性形式的Cre重組酶被激活，并通過兩個loxP位點(diǎn)之間的交換催化位點(diǎn)特異性重組，從而導(dǎo)致“固定的” EGFP和終止序列被切除。允許表達(dá)RFP和miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。

OHT（4-hydroxytamoxifen）處理miRNA表達(dá)

對于體內(nèi)注射，將4OHT（Sigma，St.Louis，MO）以20 mg / ml的濃度溶于乙醇，然后用9體積的玉米油（Sigma）稀釋。用26口徑針將稀釋的4OHT（2 mg / ml）腹腔注射（每只動物500 µl）注入動物體內(nèi)。

對于培養(yǎng)的細(xì)胞，將在乙醇中稀釋的4OHT（0.39 mg / ml）直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中（最終濃度：1-2 µM = 0.39-0.78 µg / ml）。

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 我們公司優(yōu)勢是強(qiáng)大的采購，

1：基本什么都能進(jìn)口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的，

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