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    SNAP-ChIP ® Spike-in Controls 如何工作?

    發(fā)布時間: 2021-06-25  點擊次數(shù): 1192次

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    SNAP-ChIP ®

    認證抗體

    您可以信賴的 ChIP 抗體

    抗體選擇是研究人員在設(shè)計 ChIP 實驗時必須做出的最重要的決定,但嚴格的抗體驗證既昂貴又耗時。在 EpiCypher,我們認識到這一挑戰(zhàn),并已著手進行大量工作來分析和鑒定性能最高的 ChIP 抗體。

     

     

    SNAP-ChIP ®認證抗體使用 EpiCypher 專有的SNAP-ChIP ®摻入 技術(shù)進行測試,提供針對特定核小體底物的強大應(yīng)用內(nèi)抗體驗證。這種嚴格的測試可確保在您的 ChIP 實驗中發(fā)揮可靠的性能。

     

    低交叉反應(yīng)性知識產(chǎn)權(quán)效率高廣泛的批量測試定期添加新抗體

     

    SNAP-ChIP ® Spike-in Controls 如何工作?

    SNAP-ChIP 摻入是 DNA 條形碼重組核小體的集合,可直接添加到 ChIP 實驗中以評估抗體特異性和效率。

     

    IP 之前,spike-ins 被添加到標準的 ChIP 工作流程中。PTM 特異性 DNA 條形碼的回收率由 qPCR 或下一代測序確定,揭示脫靶相互作用和富集(與摻入的輸入染色質(zhì))。

    SNAP-ChIP:使用核小體鑒定 ChIP 抗體的平臺

    抗體特異性

    SNAP-ChIP ®認證抗體經(jīng)過特異性(即交叉反應(yīng)性;左 y 軸)和富集(即回收率、效率;右 y 軸)測試,SNAP-ChIP 認證抗體與相關(guān)抗體的交叉反應(yīng)性低于 20% PTM(藍色條)并從輸入染色質(zhì)(綠色條)中恢復(fù)至少 5% 的目標 PTM。

     

    不符合這些標準的抗體(參見“失敗”圖)不適合 ChIP-seq,使用時應(yīng)格外小心,因為它們可能會導(dǎo)致不正確的生物學(xué)解釋。

    為什么核小體環(huán)境很重要?

    使用 SNAP-ChIP 摻入對照,我們發(fā)現(xiàn):

     

    常用的組蛋白 PTM 肽陣列不能預(yù)測 ChIP 中的抗體性能(Shah et al. Mol. Cel 2018)。

    許多被高度引用的抗體與相關(guān)標記發(fā)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致錯誤的生物學(xué)解釋( Shah et al. 2018 and Lam et al. 2019)。

    生產(chǎn)批次之間的抗體特異性可能會有很大差異(請參閱我們的博客)。

    SNAP-ChIP ® Spike-In 控制面板

    ChIP 定義的對照。我們提供各種組蛋白 PTM 的面板,包括賴氨酸甲基化和?;?。

     

    SNAP-ChIP ®認證抗體

    這些抗體已經(jīng)使用 SNAP-ChIP 摻入進行了驗證,并具有特異性和目標富集。

     

    SNAP-ChIP ®驗證服務(wù)

    讓專家?guī)兔?!借?span> SNAP-ChIP 驗證服務(wù),EpiCypher 將幫助您找到適合您的 ChIP-seq 研究的抗體。

     

     

    用于 CUT&RUN CUT&Tag CUTANA™ 檢測

    高性能基因組作圖分析

    用于 CUT&RUN CUT&Tag CUTANA™ 檢測 利用免疫束縛技術(shù)的最新進展提供高效、超靈敏的染色質(zhì)定位能力。與表觀基因組分析的標準檢測方法 ChIP-seq 相比,這兩項激動人心的新技術(shù)具有明顯的優(yōu)勢,包括:

     

    需要更少的細胞每個樣本只需要 3-5 百萬個測序讀數(shù)改進的信噪比顯著節(jié)省時間和成本

     

    超低輸入染色質(zhì)作圖分析

    CUTANA™ CUT&Tag 檢測基于免疫束縛技術(shù)的最新進展,提供創(chuàng)新的工作流程,使用 < 5,000 個細胞對組蛋白 PTM 進行分析。

     

    CUT&Tag 是一項新興技術(shù),其協(xié)議正在積極開發(fā)中,包括單細胞工作流程。當使用 < 5,000 個細胞核或細胞分析組蛋白 PTM 時,這種方法是理想的。對于大多數(shù)實驗,EpiCypher 強烈建議使用我們強大的 CUTANA™ CUT&RUN 檢測,該檢測兼容 5,000 500,000 個細胞,并針對各種靶標、樣品輸入、固定條件進行了優(yōu)化。

     

    * 不建議將 CUT&Tag 用于染色質(zhì)相關(guān)蛋白 請改用 CUTANA CUT&RUN 檢測。

     

    CUT&Tag 是如何工作的?

    Ç leavage ünDer ?具體目標和標記心理狀態(tài)(CUT&標記)是一種新型的immunotethering測定中,基于切割下目標和推出使用核酸酶(CUTRUN)方法。

     

    CUT&Tag 中,蛋白 A、蛋白 G Tn5 轉(zhuǎn)座酶的融合用于催化抗體結(jié)合染色質(zhì)上的同步切割和測序接頭連接。在 CUT&Tag 中使用 Tn5 是一個關(guān)鍵的進步,因為這一步驟消除了染色質(zhì)碎裂和文庫制備的需要。

     

    ChIP-seq 分析相比,CUT&Tag 分析顯示出顯著改善的信噪比 (S/N),特別是用于在超低樣本輸入中映射組蛋白 PTM。

     

     

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